ОТРАСЛЕВОЙ СТАНДАРТНЫЙ ОБРАЗЕЦ (ОСО) АКТИВНОСТИ РЕКОМБИНАНТНОГО ЧЕЛОВЕЧЕСКОГО ФАКТОРА НЕКРОЗА ОПУХОЛЕЙ-альфа (рчФНО-альфа)
(ОСО 28-212-93)
ОСО рчФНО–a используют для определения специфической (цитотоксической) активности препаратов ФНО–a , выражения ее в международных единицах (МЕ), определения подлинности препаратов ФНО–a , а также для определения специфической активности анти–ФНО–a сывороток.
РчФНО–a представляет собой полипептид, синтезированный штаммом E.coli SG 20050 pTNF 311D и идентичен природному (пч) ФНО–a, с 5–ой по 157–ю аминокислоту. В одной ампуле находится 1.0 мл лиофилизированного и герметизированного под вакуумом стерильного раствора, который содержит 1.0 мкг рчФНО–a, 5 мг человеческого донорского сывороточного альбумина и 5·10–2 моль/л фосфатно–буферного раствора.
Препарат имеет вид белой таблетки, растворяющейся в воде в течение 1 минуты. Раствор препарата бесцветен, прозрачен, не опалесцирует, не содержит механических примесей.
Средняя масса сухого вещества в ампуле – (0.0131±0.00012) г (коэффициент вариации – 2.8 %), специфическая активность в одной ампуле – 3.5x104 Е (2.6x104 x 4.6x104 Е) или 8.0x104 МЕ.
Определение активности рчФНО–a и реакцию нейтрализации необходимо ставить с использованием перевиваемой культуры мышиных фибробластов (L929) в 96–луночных микропланшетах в присутствии актиномицина D (АД) в стерильных условиях.